手術(shù)室空氣采樣的方法.doc

五月培訓(xùn)內(nèi)容：手術(shù)室空氣采樣方法1、采樣時(shí)間：消毒后、操作前進(jìn)行采樣。2、采樣方法：（1）布點(diǎn)：室內(nèi)面積30 m2，設(shè)內(nèi)、中、外對(duì)角線3點(diǎn)，內(nèi)外點(diǎn)距墻1m；室內(nèi)面積 30 m2，設(shè)四角及中央5點(diǎn)，四角點(diǎn)距墻1m。（2）平板暴露法平板直徑9cm、采樣高度1.5m，暴露5min。3、檢驗(yàn)方法平板37培養(yǎng)48h。計(jì)數(shù)菌落數(shù)并分離致病菌。4、平板暴露法結(jié)果計(jì)算50000N細(xì)菌總數(shù)（cfu/m3）=ATA為平板面積（cm2）； T 為暴露時(shí)間（min）；N 為平均菌落數(shù)（cfu）5、結(jié)果判定（1）I、II類區(qū)域，細(xì)菌總數(shù)10cfu/cm3，并未檢出致病菌為消毒合格。（2）III類區(qū)域，細(xì)菌總數(shù)200cfu/cm3，并未檢出致病菌為消毒合格。（3）IV類區(qū)域，細(xì)菌總數(shù)500cfu/cm2，并未檢出致病菌為消毒合格。6、注意事項(xiàng)：采樣前關(guān)好門窗，在無人走動(dòng)的情況下，靜止10min 進(jìn)行采樣層流手術(shù)室空氣日常監(jiān)測(cè)方法：要求日常實(shí)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，必測(cè)項(xiàng)目為平板采樣法（沉降法）或采樣器法(浮游菌法)檢測(cè)細(xì)菌菌落總數(shù)。（1）回風(fēng)口動(dòng)態(tài)平板采樣法：應(yīng)在手術(shù)開始、手術(shù)2小時(shí)、手術(shù)結(jié)束前抽檢3-4次。每個(gè)回風(fēng)口中部擺放3個(gè)傾斜30，90 培養(yǎng)皿，暴露30分鐘后，37C培養(yǎng)24小時(shí)。 標(biāo)準(zhǔn)：每皿菌落計(jì)數(shù)平均值應(yīng)符合表4標(biāo)準(zhǔn)要求。單皿最大值不應(yīng)超過平均值3倍。（2）動(dòng)態(tài)采樣器法：浮游菌菌落檢測(cè)應(yīng)在手術(shù)進(jìn)行如切皮、縫合、連臺(tái)手術(shù)之間、手術(shù)進(jìn)行4小時(shí)等，選擇不少于3個(gè)程序，測(cè)定細(xì)菌菌落總數(shù)。標(biāo)準(zhǔn)：I級(jí)30cfu/m3 ；II級(jí)150 cfu/m3；III級(jí)450 cfu/m3；IV級(jí)500 cfu/m3。（3）其他潔凈用房在當(dāng)天上午10時(shí)和下午4時(shí)各測(cè)1次，在每個(gè)回風(fēng)口中部擺放3個(gè)90培養(yǎng)皿，沉降0.5h后在37下培養(yǎng)24h。標(biāo)準(zhǔn)：同回風(fēng)口動(dòng)態(tài)平板采樣法標(biāo)準(zhǔn)。層流手術(shù)室靜態(tài)（空態(tài)）時(shí)空氣采樣方法：1、采樣方法：（1）當(dāng)送風(fēng)口集中布置時(shí)，應(yīng)對(duì)手術(shù)區(qū)和周邊區(qū)分別檢測(cè)；當(dāng)送風(fēng)口分散布置時(shí)，按全室統(tǒng)一布點(diǎn)方法檢測(cè)。（2）沉降法采樣時(shí)，用直徑9cm的培養(yǎng)皿，在空氣中暴露30min，37培養(yǎng)24h，培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)（cfu）代表空氣中沉降下來的細(xì)菌數(shù)，以個(gè)/皿表示。（3）浮游法采樣時(shí)，用裂隙采樣器在空氣中隨機(jī)采樣30min，對(duì)采樣皿或采樣條培養(yǎng)得出的菌落數(shù)（cfu），代表空氣中浮游下來的細(xì)菌數(shù)，以個(gè)/m3表示。2、采樣高度：（1）采樣點(diǎn)可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；（2）在手術(shù)區(qū)檢測(cè)時(shí)應(yīng)無手術(shù)臺(tái)；當(dāng)手術(shù)臺(tái)已固定時(shí)，檢測(cè)高度應(yīng)在臺(tái)面之上0.25cm。3、采樣注意事項(xiàng)：（1）在100級(jí)區(qū)域檢測(cè)時(shí)，采樣口應(yīng)對(duì)著氣流方向；在其他區(qū)域檢測(cè)時(shí)，采樣口均向上；（2）采樣后的培養(yǎng)基條或培養(yǎng)皿，應(yīng)37條件下培養(yǎng)24h，并計(jì)算菌落數(shù)，菌落數(shù)的平均值均四舍五入選位到小數(shù)點(diǎn)后1位；（3）當(dāng)采用浮游法測(cè)定浮游菌濃度時(shí)，細(xì)菌濃度測(cè)點(diǎn)數(shù)應(yīng)和被測(cè)區(qū)域的含塵濃度測(cè)點(diǎn)數(shù)相同，且宜在同一位置上。每次采樣應(yīng)滿足表8的最小采樣量的要求，每次采樣時(shí)間不應(yīng)小于30分鐘。（4）當(dāng)用沉降法測(cè)定沉降菌濃度時(shí)，細(xì)菌濃度測(cè)點(diǎn)數(shù)即要不少于含塵濃度測(cè)點(diǎn)數(shù)，應(yīng)滿足表9規(guī)定的最少培養(yǎng)皿數(shù)的要求（不含對(duì)照皿）。如沉降時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)，則最少要求培養(yǎng)皿數(shù)可按比例減少，但不能少于含塵濃度的最少測(cè)點(diǎn)數(shù)。（5）不論用何種方法檢測(cè)細(xì)菌濃度，都必須有兩次空白對(duì)照。第一次用于檢測(cè)培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條（每批一個(gè)對(duì)照皿（條）；第2次對(duì)操作過程做對(duì)照試驗(yàn)（每室或每區(qū)將1個(gè)對(duì)照皿（條），打開后又立即封蓋，進(jìn)行模擬操作）；兩次對(duì)照結(jié)果必須為陰性，整個(gè)操作過程應(yīng)符合無菌操作的要求。（6）新房驗(yàn)收時(shí)，應(yīng)最后做空氣、物表細(xì)菌檢測(cè)。級(jí) 潔凈手術(shù)室 5點(diǎn)（雙對(duì)角線布點(diǎn)）手術(shù)區(qū)和潔 凈輔助用房 8點(diǎn)（每邊內(nèi)2點(diǎn)）局部100級(jí)區(qū)級(jí) 周邊區(qū)級(jí) 潔凈手術(shù) 3點(diǎn)（單對(duì)角線布點(diǎn)） 集中送風(fēng)面正投影區(qū) 室手術(shù)區(qū) 6點(diǎn)（長(zhǎng)邊內(nèi)2點(diǎn)，短邊內(nèi)1點(diǎn)） 集中送風(fēng)面正投影區(qū) 級(jí) 周邊區(qū) 4點(diǎn)（每邊內(nèi)1點(diǎn)）級(jí) 周邊區(qū)級(jí)潔凈手術(shù)室及分散 4點(diǎn)（避開送風(fēng)口正下方）布置送風(fēng)口的潔凈室面 2點(diǎn)（避開送風(fēng)口正下方）