實(shí)驗(yàn)室常用血液抗凝劑的特點(diǎn)及應(yīng)用.docVIP

實(shí)驗(yàn)室常用血液抗凝劑的特點(diǎn)及應(yīng)用在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中，有許多檢測(cè)項(xiàng)目的血液標(biāo)本是需要抗凝才可以檢測(cè)的。而抗凝劑種類(lèi)較多，實(shí)際應(yīng)用中要根據(jù)不同的需要進(jìn)行選擇，才能獲得理想的效果。實(shí)驗(yàn)室中常用的抗凝劑有肝素、乙二胺四乙酸鹽（EDTA鹽）、枸櫞酸鹽、草酸鹽等4種，現(xiàn)將它們的特點(diǎn)及應(yīng)用分別敘述如下：一、肝素 抗凝是用于血液化學(xué)成分檢測(cè)的首選抗凝劑。肝素是一種含有硫酸基團(tuán)的粘多糖，是分散相物質(zhì)平均分子質(zhì)量為15000。其抗凝原理主要是通過(guò)與抗凝血酶結(jié)合引起抗凝血酶構(gòu)型發(fā)生變化，加速凝血酶-凝血酶復(fù)合體形成而產(chǎn)生抗凝作用。此外，肝素還能借助血漿輔助因子（肝素輔助因子）來(lái)抑制凝血酶。常用肝素抗凝劑是肝素的鈉、鉀、鋰、銨鹽，其中以肝素鋰最好，但其價(jià)格較貴，鈉、鉀鹽會(huì)增加血液中的鈉、鉀含量，銨鹽會(huì)增加尿素氮的含量。通常用肝素抗凝的劑量為10.012.5 IU/ml血液。肝素對(duì)血液成分干擾較少，不影響紅細(xì)胞體積，不引起溶血，適用于做紅細(xì)胞滲透性試驗(yàn)、血?dú)?、血漿滲透量、紅細(xì)胞壓積及普通生化測(cè)定。但肝素具有抗凝血酶作用，不適合做血凝試驗(yàn)。另外，肝素過(guò)量可引起白細(xì)胞聚集和血小板減少，所以不適合做白細(xì)胞分類(lèi)和血小板計(jì)數(shù)，更不能用于止血檢驗(yàn)。此外，肝素抗凝血不能用于制作血涂片，因?yàn)閃right染色后出現(xiàn)深藍(lán)色背景，影響顯微鏡減產(chǎn)。肝素抗凝血應(yīng)于短時(shí)間內(nèi)使用，否則放置過(guò)久血液又可凝固。 二、乙二胺四乙酸鹽(EDTA鹽) EDTA能與血液中Ca2+結(jié)合成螯合物，凝血過(guò)程被阻斷，血液不能發(fā)生凝固。EDTA鹽有鉀、鈉、鋰鹽，國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)推薦使用的是EDTA-K2，其溶解度最高，抗凝速度最快。EDTA鹽通常配成質(zhì)量分?jǐn)?shù)是15%的水溶液，每ml血液加1.2mgEDTA,即每5ml血液加0.04ml 15%EDTA溶液。EDTA鹽可在100下干燥，抗凝作用不變。 此抗凝劑不影響白細(xì)胞計(jì)數(shù)及大小，對(duì)紅細(xì)胞形態(tài)影響最小，并且可以抑制血小板的聚集，適用于一般血液學(xué)檢測(cè)。但如果抗凝劑濃度過(guò)高，滲透壓上升，會(huì)造成細(xì)胞皺縮。EDTA溶液pH與鹽類(lèi)關(guān)系較大，低pH可使細(xì)胞膨脹。EDTA-K2可使紅細(xì)胞體積輕度膨脹，采血后短時(shí)間內(nèi)平均血小板體積非常不穩(wěn)定半小時(shí)后趨于穩(wěn)定。EDTA-K2使 Ca2+、Mg2+下降，同時(shí)使肌酸激酶、堿性磷酸酶降低，EDTA-K2的最佳濃度為1.5mg/ml血液，如果血少，中性粒細(xì)胞會(huì)腫脹分葉消失，血小板會(huì)腫脹、崩解，產(chǎn)生正常血小板的碎片，使分析結(jié)果產(chǎn)生錯(cuò)誤。EDTA由于能抑制或干涉纖維蛋白凝塊形成時(shí)纖維蛋白單體的聚合，不適于血凝和血小板功能檢測(cè)，也不適用于鈣、鉀、鈉及含氮物質(zhì)的測(cè)定。此外，EDTA能影響某些酶的活性和抑制紅斑狼瘡因子，故不適合制作組化染色和檢查紅斑狼瘡細(xì)胞的血涂片。三、枸櫞酸鹽 枸櫞酸鹽主要是枸櫞酸鈉，其抗凝原理是能與血液中的Ca2+結(jié)合形成螯合物，使Ca2+失去凝血功能，凝血過(guò)程被阻斷，從而阻止血液凝固。枸櫞酸鈉有Na3C6H5O72H2O和2Na3C6H5O711H2O兩種晶體，通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液，與血液按照1:9體積混合。 大部分凝血試驗(yàn)都可用枸櫞酸鈉抗凝，它有助于因子和因子的穩(wěn)定，并且對(duì)平均血小板體積及其他凝血因子影響較小，可用于血小板功能分析。枸櫞酸鈉細(xì)胞毒性較小，也是輸血中血液保養(yǎng)液的成分之一。但是，枸櫞酸鈉6mg才能抗凝1ml血液，堿性強(qiáng)，不適用于血液化驗(yàn)和生化測(cè)驗(yàn)。四、草酸鹽 草酸鹽也是常用的抗凝劑，優(yōu)點(diǎn)是溶解度大，作用原理是溶解后解離的草酸根與標(biāo)本中的Ca2+形成草酸鈣沉淀，使Ca2+失去凝血功能，凝血過(guò)程被阻斷。常用的草酸鹽抗凝劑種類(lèi)有草酸鈉、草酸鉀和草酸銨，草酸鈉的常用濃度為0.1 mol/L，與血液按1:9比例使用。但是，高濃度k+或Na+易使血細(xì)胞脫水皺縮，而草酸銨則可使血細(xì)胞膨脹，故測(cè)定血細(xì)胞比容時(shí)用草酸銨與草酸鉀或草酸鈉兩者適當(dāng)比例混合的抗凝劑，恰好不影響紅細(xì)胞的形態(tài)和體積。常用于血液生化測(cè)定，但不適用于K+、Ca 2+的測(cè)定。由于生成草酸鈣沉淀，紅細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)鋸齒狀，白細(xì)胞出現(xiàn)空泡，淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞會(huì)變形，不宜做血片檢查。草酸鹽可使血小板聚集，并影響白細(xì)胞形態(tài)，不能用于白細(xì)胞和血小板分類(lèi)計(jì)數(shù)。主要參考文獻(xiàn)：1.徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)M.第三版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:1243.2.郭 建,孫葵英,孫 濱,等.抗凝劑選擇對(duì)全血細(xì)胞分析的影響.臨床檢驗(yàn)雜志,1998,16(2):311.3.張 文.臨床檢驗(yàn)抗凝劑特點(diǎn)及應(yīng)用.廣東醫(yī)學(xué),2005,26(8):1158-1159.4.周偉青.抗凝劑在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2006,15(2 4):3403-3404.5.羅學(xué)志,喻