2018屆高考生物二輪復(fù)習(xí)專題十現(xiàn)代生物科技專題跟蹤強化訓(xùn)練23基因工程與克隆技術(shù).docx

跟蹤強化訓(xùn)練(二十三)一、選擇題1(2015重慶卷)下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是()A表達(dá)載體中的胰島素基因可通過人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動于復(fù)制原(起)點C借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來D啟動子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用解析胰島素基因只在胰島B細(xì)胞中表達(dá)，肝細(xì)胞中無相應(yīng)的mRNA，A錯誤；復(fù)制啟動于復(fù)制原點，胰島素基因的表達(dá)啟動于表達(dá)載體的啟動子序列，B錯誤；抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因，作用是鑒定和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞，C正確；啟動子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的DNA序列，在基因的轉(zhuǎn)錄中起作用。終止密碼子在翻譯過程中起作用，位于mRNA上。D錯誤。答案C2(2015北京卷)在應(yīng)用農(nóng)桿菌侵染植物葉片獲得轉(zhuǎn)基因植株的常規(guī)實驗步驟中，不需要的是()A用攜帶目的基因的農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞B用選擇培養(yǎng)基篩選導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞C用聚乙二醇誘導(dǎo)轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的原生質(zhì)體融合D用適當(dāng)比例的生長素和細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)愈傷組織生芽解析將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞時，先將含有目的基因的Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，再用農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞，A項需要；用選擇培養(yǎng)基鑒定和篩選含目的基因的受體細(xì)胞，B項需要；C選項描述的是植物體細(xì)胞雜交技術(shù)及誘導(dǎo)細(xì)胞融合時所使用的試劑，C項不需要；調(diào)整生長素與細(xì)胞分裂素的配比誘導(dǎo)愈傷組織再分化，D項需要。答案C3(2016江蘇卷)近年誕生的具有劃時代意義的CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)可簡單、準(zhǔn)確地進(jìn)行基因定點編輯。其原理是由一條單鏈向?qū)NA引導(dǎo)核酸內(nèi)切酶Cas9到一個特定的基因位點進(jìn)行切割。通過設(shè)計向?qū)NA中20個堿基的識別序列，可人為選擇DNA上的目標(biāo)位點進(jìn)行切割(見下圖)。下列相關(guān)敘述錯誤的是()ACas9蛋白由相應(yīng)基因指導(dǎo)在核糖體中合成B向?qū)NA中的雙鏈區(qū)遵循堿基配對原則C向?qū)NA可在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下合成D若鏈剪切位點附近序列為TCCAGAATC則相應(yīng)的識別序列為UCCAGAAUC解析向?qū)NA具識別序列，能與DNA上的目標(biāo)位點部分序列互補配對，它是通過轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的，C錯誤。答案C4為達(dá)到相應(yīng)目的，必須通過分子檢測的是()A攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選B產(chǎn)生抗人白細(xì)胞介素8抗體的雜交瘤細(xì)胞的篩選C轉(zhuǎn)基因抗蟲棉植株抗蟲效果的鑒定D21三體綜合征的診斷解析根據(jù)受體菌是否對鏈霉素產(chǎn)生抗性進(jìn)行攜帶鏈霉素抗性基因受體菌的篩選，不需要分子檢測，A錯誤；用特定選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，才能獲得足夠多的能分泌抗人白細(xì)胞介素8抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否具有抗蟲特性，需要做抗蟲的接種實驗，C錯誤；21三體綜合征可通過用顯微鏡直接觀察體細(xì)胞中的21號染色體的數(shù)目進(jìn)行檢測，D錯誤。答案B5某種極具觀賞價值的蘭科珍稀花卉很難獲得成熟種子。為盡快推廣種植，可應(yīng)用多種技術(shù)獲得大量優(yōu)質(zhì)苗，下列技術(shù)中不能選用的是()A利用莖段扦插誘導(dǎo)生根技術(shù)快速育苗B采用花粉粒組織培養(yǎng)獲得單倍體苗C采集幼芽嫁接到合適的其他種類植物體上D采用幼葉、莖尖等部位的組織進(jìn)行組織培養(yǎng)解析據(jù)題意可知，要在短時間內(nèi)培育出大量種苗，可采用無性繁殖的方法，以保持親本的優(yōu)良性狀，如采用扦插、嫁接的方法；或選用它的幼葉或芽尖組織進(jìn)行組織培養(yǎng)；由于該花卉的花粉粒是通過減數(shù)分裂產(chǎn)生的，發(fā)生了基因重組，因此獲得的單倍體苗將難以保持其原有的觀賞價值，B項技術(shù)不能選用。答案B6下圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是()A是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C同時具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群解析應(yīng)是漿細(xì)胞，A錯誤；應(yīng)使用誘導(dǎo)劑促進(jìn)細(xì)胞的融合，動物細(xì)胞常用滅活的病毒，也可以用PEG(聚乙二醇)，B錯誤；是雜交瘤細(xì)胞，其既具有漿細(xì)胞分泌單抗體的功能，又具有骨髓瘤細(xì)胞無限增殖的特點，C錯誤。答案D二、非選擇題7(2017全國卷)編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個片段組成，編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成，如圖1所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙，若在啟動子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCTCAGGAAGGA)，則所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙，原因是_。(2)某同學(xué)在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過程中，在PCR反應(yīng)體系中加入了DNA聚合酶、引物等，還加入了序列甲作為_，加入了_作為合成DNA的原料。(3)現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白，要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細(xì)胞增殖的作用，某同學(xué)做了如下實驗：將一定量的含T淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)液平均分成四組，其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一組作為對照，培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細(xì)胞濃度，結(jié)果如圖2。由圖2可知，當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到a時，添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細(xì)胞濃度不再增加，此時若要使T淋巴細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是_。細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是_。僅根據(jù)圖1、圖2可知，上述甲、乙、丙三種蛋白中，若缺少_(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段，則會降低其刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。解析(1)在啟動子的下游接上編碼蛋白乙的DNA序列，轉(zhuǎn)錄出的mRNA沒有起始密碼子，因此所構(gòu)建的表達(dá)載體轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞后不能翻譯出蛋白乙。(2)PCR技術(shù)需要模板、Taq酶、引物和4種脫氧核苷酸。(3)細(xì)胞培養(yǎng)一段時間會出現(xiàn)接觸抑制，若要繼續(xù)培養(yǎng)需進(jìn)行傳代培養(yǎng)，培養(yǎng)過程需要維持一定的CO2濃度，CO2作用是維持培養(yǎng)液pH；甲乙對比細(xì)胞濃度最終一致，而丙組與對照組濃度接近，因此缺少C片段會降低刺激T淋巴細(xì)胞增殖的效果。答案(1)編碼乙的DNA序列起始端無ATG，轉(zhuǎn)錄出的mRNA無起始密碼子(2)模板dNTP(3)進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)維持培養(yǎng)液的pHC8(2017湖北八校高三第一次聯(lián)考)在胚胎工程中，對牛、羊等哺乳動物移植前的胚胎進(jìn)行性別鑒定，然后植入受體，可以控制后代的性別，但這種控制是在精子和卵子受精后，胚胎本身已經(jīng)有了性別的前提下進(jìn)行的，這種方法耗時長，對胚胎損傷大。SRY基因是Y染色體上的性別決定基因，SRYPCR胚胎性別鑒定技術(shù)能準(zhǔn)確鑒定早期胚胎性別，應(yīng)用前景十分廣闊。請回答與SRYPCR法鑒定胚胎性別相關(guān)的問題：(1)用SRYPCR法鑒定胚胎性別需要充足的材料并保證被測胚胎的活性，因此，首先從被測胚胎中取出幾個細(xì)胞，提取_，然后用_的一段脫氧核苷酸序列作引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。(2)進(jìn)行PCR擴(kuò)增時，需用_為模板，以_為原料，反應(yīng)體系中還應(yīng)加入適量的_酶。(3)鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物，首先制備具有_基因特異性的探針，探針需用_等做標(biāo)記，出現(xiàn)陽性反應(yīng)者，胚胎為_性。解析(1)SRY基因是Y染色體上的性別決定基因，用SRYPCR法鑒定胚胎性別，首先從被測胚胎中取出幾個細(xì)胞，提取DNA，然后用SRY基因的一段脫氧核苷酸序列做引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。(2)進(jìn)行PCR擴(kuò)增時，需用待測胚胎細(xì)胞的DNA為模板，以dCTP、dATP、dGTP和dTTP四種脫氧核苷酸為原料，反應(yīng)體系中還應(yīng)加入適量的Taq酶。(3)鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物，首先制備具有SRY基因(目的基因)特異性的探針，探針需用放射性同位素等做標(biāo)記，出現(xiàn)陽性反應(yīng)者，表明DNA上含有SRY基因，所以胚胎為雄性。答案(1)DNASRY(基因)(或Y染色體性別決定基因)(2)(待測)胚胎細(xì)胞的DNA(或提取的DNA，只答“DNA”不可)dCTP、dATP、dGTP和dTTP(或四種脫氧核苷酸)Taq(或熱穩(wěn)定DNA聚合酶)(3)SRY(或Y染色體性別決定)放射性同位素雄9(2017河南十校)如圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程。閱讀下列材料，并簡要回答下列問題：材料一近年來，細(xì)胞工程已進(jìn)入高速發(fā)展階段，已經(jīng)成為生物學(xué)領(lǐng)域中一顆耀眼的明星。該工程可在細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上，按照人們的意愿獲得新型生物或特種細(xì)胞產(chǎn)品。材料二微生物采油的關(guān)鍵技術(shù)是獲得性能優(yōu)異的菌種，應(yīng)用原生質(zhì)體融合技術(shù)將兩種微生物進(jìn)行融合，構(gòu)建耐中高溫采油微生物引起了科學(xué)家的廣泛關(guān)注。宋紹富等人選用細(xì)菌I和細(xì)菌JD先后進(jìn)行了各自抗生素抗性以及融合實驗的相關(guān)研究。研究發(fā)現(xiàn)，I菌與JD菌對不同抗生素的抗性是不同的，測量結(jié)果見表。(注：“”代表有抗性，“”代表無抗性)(1)圖中，若A細(xì)胞和B細(xì)胞均為植物細(xì)胞，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是_；形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用_技術(shù)將其培養(yǎng)成植株。(2)圖中，若A細(xì)胞和B細(xì)胞均為動物細(xì)胞，與植物細(xì)胞融合相比，從A細(xì)胞和B細(xì)胞到C細(xì)胞的過程中，_是誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素，該過程說明了細(xì)胞膜具有_。(3)利用I菌和JD菌進(jìn)行細(xì)胞融合時，首先應(yīng)使用_法去除菌體的細(xì)胞壁，將獲取的_保存在等滲溶液中待用。(4)在對I菌與JD菌融合后的融合子進(jìn)行篩選時，比較理想的是在培養(yǎng)基中添加3 g/mL紅霉素(或3 g/mL利福平)與_兩種抗生素，此種培養(yǎng)基稱為_培養(yǎng)基。解析(1)植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁；融合的雜種細(xì)胞需應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將其培養(yǎng)成植株。(2)細(xì)胞融合的方法包括物理方法、化學(xué)方法和生物方法，與植物細(xì)胞融合相比，滅活的病毒是誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素，細(xì)胞融合過程說明了細(xì)胞膜具有一定的流動性。(3)細(xì)菌細(xì)胞融合時，首先應(yīng)使用酶解法去除細(xì)菌的細(xì)胞壁，去除細(xì)胞壁的剩余部分稱為原生質(zhì)體，為保持其活性可保存在等滲溶液中待用。(4)據(jù)表可知，I菌不抗紅霉素和利福平，但抗卡那霉素，JD菌不抗卡那霉素，但抗紅霉素和利福平，因此在對I菌與JD菌融合后的融合子進(jìn)行篩選時，為了去除I菌與I菌融合后的融合子以及JD菌和JD菌融合后的融合子，需在培養(yǎng)基中添加3 g/mL紅霉素(或3 g/mL利福平)的同時，還必須加入3 g/mL的卡那霉素，此種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。答案(1)雜種細(xì)胞(或C細(xì)胞)再生出細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng)(2)滅活的病毒(一定的)流動性(3)酶解原生質(zhì)體(4)3 g/mL卡那霉素選擇10下面兩幅圖分別是單克隆抗體制備過程和克隆羊“多利”培育過程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：(1)圖中所涉及的動物細(xì)胞工程技術(shù)手段基礎(chǔ)是_，該技術(shù)的特點是