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第十三單元綜合測評(píng) (建議用時(shí): 35分鐘)1.如圖是獲得轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的技術(shù)流程示意圖。請回答:(1)AB利用的技術(shù)稱為_,其中過程需要熱穩(wěn)定的_酶才能完成。(2)圖中將目的基因?qū)朊藁?xì)胞需要經(jīng)過C過程,該過程為構(gòu)建_,其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在且可以遺傳給下一代,并能表達(dá)。(3)上述流程示意圖中,將目的基因?qū)朊藁?xì)胞所采用的方法是_法,該方法一般_(填“適宜”或“不適宜”)用于將目的基因?qū)雴巫尤~植物細(xì)胞中。(4)從FG的過程利用的主要技術(shù)為_。如果抗蟲基因?qū)氤晒?,且與一條染色體的DNA整合起來,該轉(zhuǎn)基因抗蟲棉可視為雜合子,將該轉(zhuǎn)基因抗蟲棉自交,預(yù)計(jì)后代中抗蟲植株占_。2某質(zhì)粒上有Sal、Hind、BamH 三種限制酶切割位點(diǎn),它們的識(shí)別序列和黏性末端各不相同。質(zhì)粒同時(shí)也含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示,請回答下列問題:(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi),使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀,這種變異屬于_。(2)如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞,一般情況下,煙草不會(huì)具有抗鹽特性,原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能_。(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),應(yīng)選用_和_兩種酶對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割,以保證重組DNA序列的唯一性。(4)基因工程中的檢測篩選是一個(gè)重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,下圖表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外,培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有_、_。從檢測篩選的結(jié)果分析,含有目的基因的是_(填數(shù)字)菌落中的細(xì)菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功,既要用_標(biāo)記的含抗鹽基因的DNA片段作探針進(jìn)行分子雜交檢測,又要用_的方法從個(gè)體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。(5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用_技術(shù),愈傷組織經(jīng)_進(jìn)而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加_。3肺細(xì)胞中的let7基因表達(dá)減弱,癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng),會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員在體外利用基因工程技術(shù)將let7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá),發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制,其影響機(jī)理如圖,請回答下列問題:(1)利用基因工程技術(shù)抑制肺癌細(xì)胞的增殖過程中,還需使用_技術(shù)。(2)獲取let7基因后欲進(jìn)行基因擴(kuò)增應(yīng)采用_技術(shù),其依據(jù)的原理是_。(3)基因表達(dá)載體構(gòu)建過程中需使用的工具有_。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入肺癌細(xì)胞的常用方法是_。(4)根據(jù)圖示分析,可從細(xì)胞中提取_進(jìn)行分子雜交,以直接檢測let7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制,可能是由于細(xì)胞中_(填“RASmRNA”或“RAS蛋白”)含量減少引起的。4二倍體哺乳動(dòng)物體細(xì)胞不易進(jìn)行基因操作和篩選,而生殖細(xì)胞已高度分化,不能在體外擴(kuò)增培養(yǎng)。我國科學(xué)家建立了小鼠哺乳動(dòng)物單倍體胚胎干細(xì)胞系,為基因操作找到了新的動(dòng)物模型。過程如圖所示,請據(jù)圖回答:(1)上圖中構(gòu)建的表達(dá)載體通過過程通常采用的技術(shù)是_技術(shù),基因表達(dá)載體中能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA的特殊結(jié)構(gòu)是_。設(shè)計(jì)EcoR和BamH雙酶切的目的是_。(2)單倍體胚胎干細(xì)胞取自囊胚的_細(xì)胞,單倍體胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)的條件下,可以_。(3)在過程中,科學(xué)家采用兩種策略來獲得小鼠的孤雄單倍體胚胎,一是向去核的卵母細(xì)胞中注射成熟精子,另一種方法是將剛受精后獲得的合子中的_(填“雄原核”或“雌原核”)去除。(4)過程采用的技術(shù)手段是_技術(shù),由此可見,單倍體胚胎干細(xì)胞能夠代替精子,使卵細(xì)胞成功“受精”,支撐小鼠胚胎的全程發(fā)育。(5)過程所用的技術(shù)是_技術(shù)。5基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。結(jié)合圖示回答問題。注:neor是新霉素抗性基因;tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì),導(dǎo)致細(xì)胞死亡。(1)將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到_上,構(gòu)建打靶載體(基因表達(dá)載體)。(2)打靶載體測序驗(yàn)證正確后,利用_酶,將之線性化,以提高重組率。通過_技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞,這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機(jī)會(huì)發(fā)生同源重組。(3)為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞,可在培養(yǎng)液中加入_。最后還需要通過_技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞(去除靶基因),將這樣的細(xì)胞通過_培養(yǎng)后,獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中,暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行液氮(或冷凍)保存。(4)將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚,移植到同種、_的母鼠體內(nèi),一段時(shí)間后對受體母鼠進(jìn)行_檢查,確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后,體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的_(填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”)恰巧被“修飾”過了,則它們的雜交后代中,就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。6回答下列問題:(1)若想利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得突變體,應(yīng)用物理誘變或化學(xué)誘變的方法處理_(填相應(yīng)結(jié)構(gòu))。若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體,馬鈴薯細(xì)胞含n條染色體,則通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“番茄馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)含_條染色體。(2)SRYPCR是對移植前的人胚胎進(jìn)行性別鑒定的技術(shù),需從被測胚胎的_中取出幾個(gè)細(xì)胞, 以Y染色體上SRY基因(性別決定基因)的一段序列作引物,用被測胚胎DNA作模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。如果某早期胚胎檢測結(jié)果為陽性,則可判斷該胚胎發(fā)育成的個(gè)體性別是_。(3)生物技術(shù)是一把雙刃劍,由于科學(xué)發(fā)展水平的限制,在轉(zhuǎn)基因生物中,有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果,引發(fā)了人們在食物安全、生物安全和_安全三個(gè)方面的激烈爭論。(4)為解決不孕夫婦的生育問題而出現(xiàn)了試管嬰兒技術(shù),而2002年,英國一對夫婦通過設(shè)計(jì)試管嬰兒,利用新生兒臍帶血中造血干細(xì)胞,挽救患地中海貧血癥的男孩。這兩項(xiàng)技術(shù)的區(qū)別是設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)_。(5)生態(tài)工程所遵循的基本原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理 、_、物種多樣性原理、整體性原理及_。7我國科學(xué)工作者已經(jīng)成功培育了轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,從而減少了農(nóng)藥的使用,減少了水土污染。(1)在培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時(shí),最關(guān)鍵的技術(shù)環(huán)節(jié)是_,其作用是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,復(fù)制并且表達(dá)。選取受體細(xì)胞,一般用_細(xì)胞,將目的基因?qū)胫参锸荏w細(xì)胞的常用方法是_,導(dǎo)入受體細(xì)胞后還需要采用_技術(shù)培育成抗蟲植株。(2)轉(zhuǎn)基因操作工具之一是限制性核酸內(nèi)切酶,該酶所具有的特異性具體表現(xiàn)在:一種限制酶只能_。當(dāng)限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列中軸線的兩側(cè)時(shí),切割產(chǎn)生的是_末端。(3)?;~塘生態(tài)農(nóng)業(yè)模式將蠶糞喂魚,塘泥肥田,提高了經(jīng)濟(jì)效益,也有良好的生態(tài)效益,但這種模式并不適合全國各地,只有在南方降水較多,氣候溫暖的地區(qū)才適用。以上表述體現(xiàn)了生態(tài)工程的_原理。第十三單元綜合測評(píng)1(1)PCRDNA聚合(2)基因表達(dá)載體(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化不適宜(4)植物組織培養(yǎng)3/4【解析】(1)AB利用的技術(shù)稱為PCR,其中過程需要熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(Taq酶)才能完成。(2)圖中將目的基因?qū)朊藁?xì)胞需要經(jīng)過C過程,該過程為構(gòu)建基因表達(dá)載體(重組DNA),其目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在且可以遺傳給下一代,并能表達(dá)。(3)上述流程示意圖中,將目的基因?qū)朊藁?xì)胞所采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,該方法一般不適宜用于將目的基因?qū)雴巫尤~植物細(xì)胞中。(4)FG的過程利用的主要技術(shù)為植物組織培養(yǎng),欲確定抗蟲基因在G體內(nèi)是否表達(dá),在個(gè)體水平上需要做抗蟲接種實(shí)驗(yàn),如果抗蟲基因?qū)氤晒?,且與一條染色體的DNA整合起來,該轉(zhuǎn)基因抗蟲棉可視為雜合子(用Gg表示),將該轉(zhuǎn)基因抗蟲棉自交,預(yù)計(jì)后代中抗蟲植株G_占3/4。2(1)基因重組(2)穩(wěn)定存在并表達(dá)(3)SalHind(4)氨芐青霉素四環(huán)素(氨芐青霉素和四環(huán)素)4和6放射性同位素一定濃度的鹽水澆灌煙草植株(將煙草植株移栽到鹽堿地中)(5)植物組織培養(yǎng)再分化植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)【解析】(1)基因工程的原理是基因重組。(2)將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞,一般情況下,煙草不會(huì)具有抗鹽特性,原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能復(fù)制,也不能表達(dá),即不能轉(zhuǎn)錄和翻譯成相應(yīng)的蛋白質(zhì)。(3)用Sal和Hind兩種限制酶對質(zhì)粒和目的基因進(jìn)行切割時(shí),可保證重組DNA序列的唯一性。(4)用Sal和Hind兩種限制酶對質(zhì)粒進(jìn)行切割時(shí),會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因,但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因,因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存,所以培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別含有氨芐青霉素、四環(huán)素,含目的基因的是4和6菌落中的細(xì)菌。探針是指用放射性同位素標(biāo)記的目的基因(抗鹽基因)。除了從分子水平上進(jìn)行檢測,還可以從個(gè)體水平上進(jìn)行鑒定,即用一定濃度的鹽水澆灌煙草植株來鑒定煙草的耐鹽性。(5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用植物組織培養(yǎng)技術(shù),愈傷組織經(jīng)再分化進(jìn)而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加相應(yīng)的植物激素。3(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(2)PCRDNA雙鏈復(fù)制(3)限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)、DNA連接酶、運(yùn)載體顯微注射法(4)RNA(或mRNA)RAS蛋白4(1)顯微注射啟動(dòng)子防止質(zhì)粒自身環(huán)化(2)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)增殖而不發(fā)生分化(3)雌原核(4)動(dòng)物細(xì)胞融合(5)胚胎移植5(1)載體(或質(zhì)粒)(2)限制顯微注射(3)新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交動(dòng)物細(xì)胞(或克隆)(4)生理狀態(tài)相同(或經(jīng)同期發(fā)情處理)妊娠生殖細(xì)胞【解析】(1)構(gòu)建打靶載體(基因表達(dá)載體),需要將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體(或質(zhì)粒)上。(2)將環(huán)狀的打靶載體線性化,需利用限制酶進(jìn)行切割,通過顯微注射技術(shù)將其導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞。(3)在同源重組時(shí),tk基因?qū)⒈磺谐鴣G失,但新霉素抗性基因得以保留且結(jié)構(gòu)完整,所以為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞,可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。鑒定去除靶基因的同源重組的細(xì)胞,可通過DNA分子雜交技術(shù)。將這樣的細(xì)胞通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)后,獲得大量打靶成功的細(xì)胞。(4)胚胎移植時(shí),需將含有打靶成功細(xì)胞的囊胚移植到同種、生理狀態(tài)相同(或經(jīng)同期發(fā)情處理)的母鼠體內(nèi),一段時(shí)間后對受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查,確保其生下嵌合小鼠。生殖細(xì)胞參與新個(gè)體的形成過程,如果某些小鼠的生殖細(xì)胞恰巧被“修飾”過了,則它們的雜交后代中,就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。6(1)愈傷組織mn(2)滋養(yǎng)層男性(3) 環(huán)境(4)胚胎移植前需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷(5)協(xié)調(diào)與平衡原理系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理【解析】(1)若想利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得突變體,應(yīng)用物理誘變或化學(xué)誘變的方法處理愈傷組織。若番茄細(xì)胞內(nèi)有m條染色體,馬鈴薯細(xì)胞含n條染色體,則通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的“番茄馬鈴薯”細(xì)胞內(nèi)含mn條染色體。(2)SRYPCR是對移植前的人胚胎進(jìn)行性別鑒定的技術(shù),需從被測胚胎的滋養(yǎng)層中取出幾個(gè)細(xì)胞,以Y染色體上SRY基因(性別決定基因)的一段序列作引物,用被測胚胎DNA作模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。如果某早期胚胎檢測結(jié)果為陽性,則可判斷該胚胎發(fā)育成的個(gè)體性別是男性。(3)生物技術(shù)是一把雙刃劍,由于科學(xué)發(fā)展水平的限制,在轉(zhuǎn)基因生物中,有時(shí)候會(huì)出現(xiàn)一些人們意想不到的后果,引發(fā)了人們在食物安全、生物安全和環(huán)境安全三個(gè)方面
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