實驗13Vc含量的測定.ppt

實驗十三：VC含量的測定 （2, 6-二氯靛酚法）,1. 引言 維生素C是一種己糖醛基酸，有抗壞血病的作用，所以又稱作抗壞血酸。維生素C廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤豐富。,維生素C是一種水溶性維生素，在酸性介質(zhì)中很穩(wěn)定，既使加熱也不破壞；但在堿性介質(zhì)中不穩(wěn)定，易于分解，特別在堿性條件下加熱，可大部分或全部破壞。它們易受空氣、光、熱、酶、金屬離子等的影響。,維生素C具有較強的還原性，氧化后的產(chǎn)物稱為脫氫抗壞血酸，仍然具有生理活性，進一步水解則生成2, 3-二酮古樂糖酸，失去生理作用。,還原型,氧化型,2. 實驗原理 還原型抗壞血酸能還原染料2, 6-二氯酚靛酚，本身則氧化為脫氫型。在酸性溶液中，2, 6-二氯酚靛酚呈紅色，還原后變?yōu)闊o色 。一旦溶液中的VC全部被氧化時，則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色。所以，當溶液從無色變成微紅色時即表示溶液中的VC剛剛?cè)勘谎趸?，此時即為滴定終點。,2, 6-二氯靛酚： 氧化態(tài)：深藍色 還原態(tài)：無色 堿 性：深藍色 酸 性：淺紅色,3. 實驗材料、儀器與試劑 材料：棗 儀器：三角瓶、研缽、移液管、漏斗、鐵架 臺、容量瓶，滴定管、分析天平 試劑： 2%草酸溶液 標準抗壞血酸溶液（0.2mg/mL） 0.02% 2, 6-二氯靛酚,4. 實驗步驟 （1）樣品處理：稱取1g棗，放在研缽中，加入少許2%草酸溶液研碎，再轉(zhuǎn)入100mL容量瓶中，加2%草酸定容至刻度，過濾，棄去初濾液，用干燥的燒杯收集濾液備用。,（2）2, 6-二氯靛酚溶液的標定：取1mL標準抗壞血酸溶液于100mL三角瓶中，加入9mL 2%草酸溶液，用2, 6-二氯靛酚溶液滴定至微紅色，且15s不褪色。記錄消耗2, 6-二氯靛酚溶液的體積，平行操作三次，取其平均，計算出1mL染料相當于抗壞血酸的毫克數(shù)。另取2%草酸溶液10mL做空白。,滴定度T（mg/mL）=,T：每mL2, 6-二氯靛酚溶液相當于抗壞血酸的毫克數(shù) C：抗壞血酸的濃度，mg/mL V：吸取抗壞血酸的體積，mL V1：滴定抗壞血酸消耗染料的體積，mL V2：滴定空白消耗染料的體積，mL,（3）樣品溶液的測定：吸取濾液5mL于100mL三角瓶中，加入5mL2%草酸溶液，用已標定的2, 6-二氯靛酚溶液滴定至出現(xiàn)微紅色，且15s不褪色為止，記錄消耗染料的體積，平行操作三次，取其平均。同時，取10mL2%草酸做空白實驗。,5. 結(jié)果計算,T：滴定度（mg/mL） W：樣品的質(zhì)量（g） V1：滴定樣品消耗染料的體積（mL） V2 ：滴定空白消耗染料的體積（mL） V3 ：滴定時吸取樣品溶液的體積（mL） V4 ：樣品定容的體積（mL）,6. 注意事項 （1）所有試劑配制最好用重蒸水。 （2）某些水果、蔬菜（如橘子、西紅柿等）漿狀物泡沫太多，可加數(shù)滴丁醇或辛醇。 （3）提取的漿狀物如不易過濾，亦可離心，留取上清液進行滴定。,（4）整個操作過程要迅速，防止還原型抗壞血酸被氧化，滴定過程一般不超過2min。滴定所用的染料不應(yīng)小于1mL或多于4mL，如果樣品含抗壞血酸太高或太低時，可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。,（5）若樣品濾液顏色較深，影響滴定終點觀察，可加入白陶土再過濾