GB 28316-2012 食品添加劑 番茄紅.pdf

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) GB 283162012 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 番茄紅 中 華 人 民 共 和 國 衛(wèi) 生 部中 華 人 民 共 和 國 衛(wèi) 生 部 發(fā)布 2012-04-25 發(fā)布 2012-06-25 實(shí)施 GB 283162012 1 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑 番茄紅 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)適用于以番茄（Lycopersicon）或番茄制品為原料，以超臨界流體（包括二氧化碳等）或有機(jī) 溶劑為萃取介質(zhì)制備的食品添加劑番茄紅。 2 分子式、結(jié)構(gòu)式、相對分子質(zhì)量 2.1 分子式 番茄紅素：C40H56 2.2 結(jié)構(gòu)式 CH3CH3 CH3CH3 CH3CH3CH3 CH3CH3CH3 全反式番茄紅素化學(xué)結(jié)構(gòu)式 2.3 相對分子質(zhì)量 536.87（按2007年國際相對原子質(zhì)量） 3 技術(shù)要求 3.1 感官要求：應(yīng)符合表 1 的規(guī)定。 表 1 感官要求 項(xiàng) 目 要 求 檢驗(yàn)方法 色澤 深紅色 取適量樣品置于清潔、干燥的白瓷盤中，在 自然光線下，觀察其色澤和狀態(tài) 狀態(tài) 膏狀物或油狀液體或粉末（晶體） 3.2 理化指標(biāo)：應(yīng)符合表 2 的規(guī)定。 GB 283162012 2 表 2 理化指標(biāo) 項(xiàng) 目 指 標(biāo) 檢測方法 番茄紅素含量，w/% 5.0 附錄 A 中 A.3 總類胡蘿卜素含量，w/% 5.5 附錄 A 中 A.4 鉛（Pb）/（mg/kg） 1.0 GB 5009.12 總砷（以 As 計）/（mg/kg） 3.0 GB/T 5009.11 殘留溶劑 a/（mg/kg） 50b 乙酸乙酯：附錄 A 中 A.5 正己烷：GB/T 5009.37 殘留溶劑 注：商品化的番茄紅產(chǎn)品應(yīng)以符合本標(biāo)準(zhǔn)的番茄紅為原料，可添加符合食品添加劑質(zhì)量規(guī)格要求的明膠、抗氧化劑和(或) 食用的糊精、植物油、淀粉而制成，其番茄紅素含量和總類胡蘿卜素含量符合標(biāo)識值。 a超臨界流體萃取的產(chǎn)品除外。 b乙酸乙酯和正己烷單獨(dú)或兩者之和。 GB 283162012 3 附 錄 A 檢驗(yàn)方法 A.1 一般規(guī)定 本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T 66822008中規(guī)定的三級水。 試驗(yàn)中所用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液、雜質(zhì)測定用標(biāo)準(zhǔn)溶液、制劑及制品，在沒有注明其他要求時，均按GB/T 601、 GB/T 602、GB/T 603的規(guī)定制備。試驗(yàn)中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。 A.2 鑒別試驗(yàn) A.2.1 溶解性 易溶于乙酸乙酯和正己烷，部分溶于乙醇和丙酮，不溶于水。 A.2.2 顏色反應(yīng) 稱取約0.01 g試樣，溶于10 mL丙酮中，形成橙紅色透明溶液，向其中連續(xù)滴加等體積的5% 硝酸鈉 溶液（5 g溶于100 mL水中）和 1 mol/L 硫酸溶液,試樣溶液的顏色變淺。 A.2.3 特征吸收峰 取適量試樣，溶于正己烷中，此試樣溶液在446 nm、472 nm、505 nm附近波長處有特征吸收峰。 A.3 番茄紅素含量的測定 A.3.1 試劑和材料 A.3.1.1 二氯甲烷：色譜純。 A.3.1.2 乙腈：色譜純。 A.3.1.3 乙酸乙酯：色譜純。 A.3.1.4 水：一級水。 A.3.1.5 乙醇。 A.3.1.6 石油醚：沸程 6090。 A.3.1.7 2,6-二叔丁基對甲酚（BHT）。 A.3.1.8 番茄紅素對照品：純度90%。 A.3.2 儀器和設(shè)備 A.3.2.1 高效液相色譜儀。 A.3.2.2 紫外-可見分光光度計。 A.3.3 參考色譜條件 A.3.3.1 色譜柱：固定相為 C18，250 mm4.6 mm，5 m；或其他等效的色譜柱。 A.3.3.2 柱溫：25。 A.3.3.3 檢測器：紫外/可見光檢測器或二極管陣列檢測器。 A.3.3.4 檢測波長：472 nm。 A.3.3.5 流動相：流動相A為乙腈溶液（91），流動相B為乙酸乙酯。洗脫條件為二元線型梯度：流動 相B在20 min內(nèi)由0%上升到100%，20 min后流動相B保持100%運(yùn)行5 min。 A.3.3.6 流速：1.0 mL/min。 A.3.3.7 進(jìn)樣量：10L。 A.3.4分析步驟 A.3.4.1 BHT 溶液的配制 GB 283162012 4 ) 1 .( 3450 10000 max ST DA c 準(zhǔn)確稱量2.5 g BHT 置于500 mL 棕色容量瓶中，用二氯甲烷定容，濃度為5000 mg/L，密閉避光放 置，可穩(wěn)定儲存3個月。 A.3.4.2 番茄紅素對照品溶液的配制 分別稱取10 mg 番茄紅素對照品和20 mg BHT，精確至0.000 1 g，取少量二氯甲烷溶解后，轉(zhuǎn)移至 100 mL棕色容量瓶中，用二氯甲烷定容，混合均勻。由于番茄紅素不穩(wěn)定，番茄紅素對照品溶液使用前 應(yīng)采用A.3.4.3方法標(biāo)定其純度。番茄紅素對照品溶液應(yīng)在-20條件下儲存，24 h內(nèi)可使用。 A.3.4.3 番茄紅素對照品溶液的標(biāo)定 量取1 mL（VA）番茄紅素對照品溶液，置于50 mL（VB）棕色容量瓶中，加入5 mL 乙醇和5 mL BHT 溶液，用石油醚定容，混勻。將此溶液置于1 cm 比色皿中，以石油醚作空白對照，用紫外-可見光分光 光度計在472 nm附近的最大吸收波長處測定吸光度。 吸光度應(yīng)控制在0.30.7之間， 否則應(yīng)調(diào)整溶液濃度， 再重新測定吸光度。 番茄紅素對照品溶液中番茄紅素濃度以cST 計， 單位為毫克每升 （mg/L） ,按公式 （A.1） 計算： 式中： Amax 番茄紅素對照品溶液在472 nm 附近的最大吸收波長處測得的吸光度值； D 稀釋因子（VB/VA）； 10000 濃度換算因子； 3450 番茄紅素的吸光系數(shù)。 A.3.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別吸取適量番茄紅素對照品溶液， 用二氯甲烷稀釋， 并用棕色容量瓶定容， 配制成濃度分別為1.0 g/ mL、5.0 g/ mL、10.0 g/ mL、20.0 g/ mL、30.0 g/ mL、40.0 g/ mL、50.0 g/ mL系列的番茄紅素 標(biāo)準(zhǔn)溶液。在A.3.3參考色譜條件下，對系列的番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行色譜分析，得到峰面積值-番茄紅 素濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。 A.3.4.5 試樣液的配制 取適量試樣置于玻璃容器中， 于60 水浴中30 min融化。 稱取融化后的試樣1.0 g1.2 g， 精確至0.000 1 g，用少量二氯甲烷溶解后轉(zhuǎn)移至100 mL 棕色容量瓶中，加入10 mL BHT溶液，超聲混勻，冷卻至室 溫，用二氯甲烷定容。再取1 mL置于50 mL 棕色容量瓶中，用二氯甲烷定容，混勻后用于高效液相色譜 分析。 A.3.4.6 測定 在A.3.3參考色譜條件下，對試樣液進(jìn)行色譜分析，以保留時間和光譜特征定性，以試樣中番茄紅素組 分峰面積與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較定量。 A.3.5 結(jié)果計算 番茄紅素含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w1計，數(shù)值以%表示，按公式（A.2）計算： 式中： c 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的試樣液中番茄紅素濃度的數(shù)值，單位為微克每毫升（g/mL）； V 試樣定容體積的數(shù)值，單位為毫升（mL）； m 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； 1000 1000質(zhì)量換算因子。 在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的5%。 )2 .(%100 10001000 1 m Vc w GB 283162012 5 A.4 總類胡蘿卜素含量的測定 A.4.1試劑和材料 A.4.1.1 二氯甲烷。 A.4.1.2 2,6-二叔丁基對甲酚（BHT）。 A.4.1.3 乙醇 A.4.1.4 石油醚 A.4.1.5 BHT 溶液：準(zhǔn)確稱量2.5 g BHT 置于500 mL 棕色容量瓶中，用二氯甲烷定容，濃度為5000 mg/L，密閉避光放置，可穩(wěn)定儲存3個月。 A.4.2儀器和設(shè)備 紫外-可見光分光光度計。 A.4.3分析步驟 A.4.3.1 試樣液的制備 取適量試樣置于玻璃容器中，60 水浴30 min 融化。稱取融化后的試樣1.0 g1.2 g，精確至0.000 1 g，取少量二氯甲烷溶解后置于100 mL 棕色容量瓶中,加入10 mL BHT溶液，超聲混勻，冷卻至室溫， 二氯甲烷定容（溶液A）。從溶液A 中轉(zhuǎn)移5 mL （VC），置于50 mL （VD）棕色容量瓶中，二氯甲烷 定容（溶液B）。轉(zhuǎn)移2 mL（VE） 溶液B 置于100 mL 棕色容量瓶（VF）中，添加10 mL 乙醇，石油醚 定容，混合均勻，記作溶液C。 A.4.3.2 測定 采用紫外-可見光分光光度計掃描，1 cm 比色皿，波長范圍300 nm550 nm,石油醚作空白，記錄 溶液C 的最大吸光度（吸光度應(yīng)控制在0.20.8之間）。 A.4.3.3 結(jié)果計算 總類胡蘿卜素含量以番茄紅素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w2計，數(shù)值以%表示，按公式（A.3）計算： 式中： A 溶液C 的最大吸光度值； mS 試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）； D 稀釋因子 ( VFVD）/（VEVC）； 3450 番茄紅素的吸光系數(shù)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值 不得超過算術(shù)平均值的2%。 A.5 乙酸乙酯的測定 A.5.1 儀器和設(shè)備 配備頂空進(jìn)樣器和氫火焰離子檢測器(FID)的氣相色譜儀。 A.5.2 參考色譜條件 A.5.2.1 色譜柱：交聯(lián)鍵合5%二苯基95%聚二甲基硅氧烷固定液的石英毛細(xì)管柱，30 m0.53 mm，膜 厚3.0 m；或其他等效的色譜柱。 A.5.2.2 載氣：氮?dú)狻?A.5.2.3 載氣流量：4.0 mL/min。 A.5.2.4 進(jìn)樣口溫度：180 。 )3.(100 3450 2 S m DA w GB 283162012 6 A.5.2.5 柱溫：73 ，保持5 min，以25 /min的速率升溫至160 ，保持1 min。 A.5.2.6 檢測器溫度：230 。 A.5.2.7 進(jìn)樣體積：1 mL 定量環(huán)。 A.5.2.8 分流比：16 。 A.5.3 頂空條件 A.5.3.1 頂空瓶平衡溫度及時間：70 ，120.0 min。 A.5.3.2 定量環(huán)溫度：100 。 A.5.3.3 傳輸線溫度：110 。 A.5.3.4 混合方式：每30 min攪拌1 min。 A.5.3.5 加壓時間：0.2 min。 A.5.3.6 定量環(huán)填充時間：0.2 min。 A.5.3.7 定量環(huán)平衡時間：0.05 min。 A.5.3.8 進(jìn)樣時間：1.0 min。 A.5.3.9 頂空瓶壓力：95.15kPa（13.8 psi） 。 A.5.3.10 進(jìn)樣量：1 mL。 A.5.4 分析步驟 A.5.4.1 對照液制備 A.5.4.1.1 乙酸乙酯貯備液A(10,000 mg/kg) 在天平上放置一空量瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙酯500 mg，再精密加入鄰苯二甲酸二乙酯使得 溶劑量達(dá)到50.00 g，精確至0.1 mg，超聲混勻。此溶液在室溫環(huán)境下可穩(wěn)定存放2個月。 A.5.4.1.2 乙酸乙酯貯備液B(100 mg/kg) 在天平上放置一空量瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙酯貯備液A 500 mg，再精密加入鄰苯二甲酸二乙 酯使得溶劑量達(dá)到50.00 g，精確至0.1 mg，超聲混勻。此溶液在室溫環(huán)境下可穩(wěn)定存放2個月。 A.5.4.1.3 乙酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)溶液C(5 mg/kg) 在天平上放置一空頂空瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙酯貯備液B 500 mg，再精密加入鄰苯二甲酸二 乙酯使得溶劑量達(dá)到10.00 g，精確至0.1 mg，放入1個12 mm15 mm的磁力攪拌棒。密封，混勻。 A.5.4.1.4 乙酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)溶液D(10 mg/kg) 在天平上放置一空頂空瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙酯貯備液B 1000 mg，再精密加入鄰苯二甲酸 二乙酯使得溶劑量達(dá)到10.00 g，精確至0.1 mg，放入1個12 mm15 mm的磁力攪拌棒。密封，混勻。 A.5.4.1.5 乙酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)溶液E(17.5 mg/kg) 在天平上放置一空頂空瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙酯貯備液B 1750 mg，再精密加入鄰苯二甲酸 二乙酯使得溶劑量達(dá)到10.00 g，精確至0.1 mg，放入1個12 mm15 mm的磁力攪拌棒。密封，混勻。 A.5.4.1.6 乙酸乙酯標(biāo)準(zhǔn)溶液F(25 mg/kg) 在天平上放置一空頂空瓶，扣除瓶重后精密加入乙酸乙酯貯備液B 2500 mg，再精密加入鄰苯二甲酸 二乙酯使得溶劑量達(dá)到10.00 g，精確至0.1 mg，放入1個12 mm15 mm的磁力攪拌棒。密封，混勻。 A.5.4.2 試樣液制備 測定前，取約30 g試樣，加熱至40 C50 C，機(jī)械攪拌。趁熱精密稱取5000 mg，置于1個預(yù)先稱重 的頂空瓶中， 精密加入鄰苯二甲酸二乙酯， 使試樣和溶劑的總重為10.00 g， 精確至0.1 mg， 放入1個12 mm